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HIV-1 p24 ELISA 檢測試劑盒

產品簡介

HIV-1 p24 ELISA 檢測試劑盒采用雙抗夾心法檢測樣本中 HIV-1 p24蛋白,將HIV-1 p24特異性單克隆抗體預包被在微孔板上,將標準品與待測樣本加入到已包被的反應孔內進行孵育。適用于快速檢測任何基于HIV-1的慢病毒的p24蛋白含量測定。柏萊源生物為譜新生物代理商,具體產品價格與技術問題等信息咨詢,請聯系我們!

產品型號:HG-P001
更新時間:2025-12-02
訪問量:653
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    HIV-1 p24 ELISA  檢測試劑盒說明書


貨號: HG-P001

HIV-1 p24 ELISA 檢測試劑盒


產品簡介:

本品采用雙抗夾心法檢測樣本中 HIV-1 p24蛋白,將HIV-1 p24特異性單克隆抗體預包被在微孔板上,將標準品與待測樣本加入到已包被的反應孔內進行孵育。存在的 HIV-1 p24 蛋白會定量的與微孔板中的抗體結合,洗滌除去未結合物,加入生物i素標記的抗p24 抗體,最后加入親和素標記 HRP,形成抗體-抗原-生物i素抗體-酶標親和素復合物,通過TMB顯色程度指示樣品中蛋白含量。使用前請仔細閱讀說明書并檢查試劑盒組分。
檢測范圍: 6.25 - 200 pg/mL
定  量  限: 6.25 pg/mL
檢  測  限: 3.125 pg/mL
精  密  度: CV%≤10%  RE%≤±15%

規格:

96T

應用:

適用于快速檢測任何基于HIV-1的慢病毒的p24蛋白含量測定。

試劑盒組成:

組分規格配制
HIV-1 p24 Coated Plate(包被酶標板)8孔×12條即用型
Anti-p24-Biotin(檢測抗體100x)150μL×1管1:99用20%CS稀釋緩沖液稀釋
Streptavidin HRP(酶結合物100x)150μL×1管1:99用20%CS稀釋緩沖液稀釋
HIV-1 p24 Standard(標準品)30μLx1管(0.48mg/mL)按建議稀釋方式操作
Lysis Buffer(裂解液)1.5mL×1管即用型
20%CS Buffer25mL×1瓶即用型
Sample Diluent Buffer(樣品稀釋液)50mL×1瓶即用型
20×PBST Wash Buffer(20×PBST洗液)50mL×1瓶1:19用去離子水稀釋
Color Reagent A(底物顯色液A)7mL×1瓶即用型
Color Reagent B(底物顯色液B)7mL×1瓶即用型
Stop Solution(終止液)7mL×1瓶即用型
封板膜5張即用型
說明書1份即用型




備 注:檢測抗體、酶結合物、標準品和 20% CS Buffer -20℃保存,其他組分 2~8℃避光保存,有效期 12 個月。




需自行準備的材料

◆酶標儀

◆去離子水

◆恒溫培養箱

◆全新濾紙

◆微量加液器及吸頭

◆渦旋振蕩器


試劑配制

1.平衡:將所需試劑移到室溫(18~25℃)平衡30分鐘。
2.配液:
①1×PBST洗滌液:計算實驗所需工作液體積,取適量20×PBST洗液,用去離子水1:19稀釋稀釋,混勻后備用。
②檢測抗體及酶結合物工作液:計算實驗所需工作液體積,取適量生物i素抗體或酶潔合物用 20% CS Buffer1:99稀釋,充分混勻備用。
③準品及樣品使用樣品稀釋液進行稀釋。
3.標準品稀釋:標準品第一個中間梯度(Pre-1)-20°C可存放 1-7 天。


管號標準液濃度
(pg/mL)
標準液體積
(μL)
稀釋液體積
(μL)
總體積
(μL)
終濃度
(pg/mL)
剩余體積
(μL)
Pre-1480000000 495 500 4800000 490 
Pre-24800000 10 470 480 100000 475 
Pre-3100000 45 50 10000 30 
Pre-410000 20 180 200 1000 80 
1000 120 480 600 200 300 
200 300 300 600 100 300 
100 300 300 600 50 300 
50 300 300 600 25 300 
25 300 300 600 12.5 300 
12.5 300 300 600 6.25 600 
//300 300 300 



操作步驟

1.使用前,將所有試劑充分混勻,避免產生氣泡。
2.根據實驗孔數量,確定所需的板條數目,剩余板條放回含干燥劑的鋁箔袋,密封。
3. 加樣:每孔加入10uL 裂解液,再加入90uL 標準品、樣品稀釋工作液、陰性對照至相應孔中。用封板膜封板后置 37℃恒溫震蕩培養箱,200-300rpm,溫育60分鐘。
4. 洗滌:棄去各孔內液體,用1XPBST洗滌液注滿微孔(300μL/孔),靜置 30 秒后棄去孔內液體;重復3次,每一次洗板完成后在濾紙上拍干。
5. 加生物i素檢測抗體工作液:每孔加生物i素檢測抗體工作液 100uL,用封板膜封板后置 37℃恒溫震蕩培養箱,200-300rpm,溫育 60 分鐘。
6. 洗滌:棄去各孔內液體,用1XPBST洗滌液注滿微孔(300uL/孔),靜置 30 秒后棄去孔內液體;重復3次,每一次洗板完成后在面巾紙上拍干。
7. 加酶結合物工作液: 每孔加酶結合物工作液 100uL,用封板膜封板后置 37℃恒溫震蕩培養箱,200-300rpm,溫育 60分鐘。
8. 洗滌:棄去各孔內液體,用1XPBST洗滌液注滿微孔(300uL/孔),靜置 30 秒后棄去孔內液體;重復3次,每一次洗板完成后在面巾紙上拍干。
9. 顯色:每孔分別加底物顯色液A50uL,底物顯色液B50uL,輕微振蕩混勻后用封板膜封板置 25℃避光顯色 10 分鐘。
10. 測定:每孔加終止液50uL,輕微混勻。選擇酶標儀主波長450nm,參考波長630nm,測定各孔吸光值(OD 值)。

結果處理

本產品建議采用四參數的擬合方式進行線性擬合及計算。
1. 標準曲線OD處理(見下例,僅為示例,具體以
實際測定為準)


標準品濃度(pg/mL)O D 值 ( 1 )O D 值 ( 2 )平均值
200 2.846 2.841 2.844 
100 1.965 1.979 1.972 
50 1.110 1.189 1.150 
25 0.636 0.582 0.609 
12.5 0.362 0.338 0.350 
6.25 0.213 0.204 0.209 
0.061 0.059 0.060 









2. 以標準品理論濃度與對應OD值進行四參數擬合,得到標準曲線(如下圖所示)

檢驗方法的局限性

本試劑僅用于檢測樣本中 P24 蛋白組分的含量。

注意事項

1. 若檢測具有極i高水平p24 蛋白的樣本。含有高水平 p24(即>200pg/mL)的樣品必須在測定前進行稀釋,以獲得準確的p24 值。這類樣本可能包括慢病毒上清,通常慢病毒粗毒液建議稀釋 5000-40000 倍,成品建議稀釋 40000-160000倍。首i次檢測建議進行至少3個連續倍數的稀釋,以在標準曲線范圍內產生至少一個稀釋后樣品。在進一步分析或稀釋前,需充分混合稀釋液。每份樣品重復分析兩次,以確定原始樣品中正確的 p24 值。
2. 試劑按標簽說明儲存,使用前室溫(18~25℃)平衡。
3. 預包被酶標板使用前,請平衡至室溫(18~25℃)再打開外包裝袋,實驗中不用的板條立即放回包裝中密封,4℃可保存一個月。其余不用試劑應包裝好或蓋好。
4. 標準品、生物i素及酶結合物體積量很小,使用前請短暫離心,以使管壁或管蓋的液體沉積到管底。
5. 實驗操作中請使用一次性的吸頭,避免交叉污染。
6. 使用前檢查試劑盒內各種試劑。試劑稀釋、加樣和終止反應應充分混勻或搖勻對實驗結果尤為重要。
7. 洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在潔凈的紙巾上充分拍干,直至看不到水印。勿將紙巾直接放入反應孔中吸水。
8. 底物顯色液對光敏感,避免長時間暴露于光下,避免與金屬接觸影響結果。
9. 本產品為一次性使用的試劑盒,請在效期內使用。


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柏萊源(天津)生物科技有限公司的優勢:

現貨供應:公司庫存充足,可快速發貨,減少用戶等待時間。

效期保障:嚴格把控產品質量,確保試劑效期新鮮,保障實驗結果的可靠性。

專業技術支持:提供詳細的實驗方案和技術指導,幫助用戶優化實驗條件,提高實驗成功率。

定制化服務:根據用戶需求,提供個性化的產品和服務解決方案。

售后保障:完善的售后服務體系,及時解決用戶在使用過程中遇到的問題。

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